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离心分离PCR后样品
更新时间:2023-05-29   点击次数:305次
用Hitachi CR—G离心机,R10H转头分离PCR后(DNA或其他生物大分子)样品
A液:20%PEG6000,2.5M NaCl 及Isopropanol (异丙醇)
 
分离步骤:
1.用384孔板或96孔板,按比例增加容量,在PCR仪中扩增反应后
2.每孔内含10ul PCR后样品及10ul A液
3.微板先用摇床充分混匀。
4.对称加入P10H转头(二块或四块,384孔板)
5.离心10,000rpm(约13,000xg)×10分,4℃,加速“9",减速“9"
6.取出微孔板
7.用Kimtowels 纸贴在R10转头放微板架的内壁
8.去掉微板盖并把微板倒过来放入R10H 转头微板架。
9.预置转速1000rpm,10分,4℃,加速“9",减速“9",在速度显示到达300rpm时停车。
10.从微板中取出转头,沉淀可作出进一步实验。
 
特点:1. 转速高(一般微板转头都在5000rpm,4000xg以下)回收率高。
      2. 沉淀紧,反向低速离心后上清全部被纸吸干。
      3. 用于DNA测序前样品制备最合适。

离心机

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